Camellia sinensis (l.) o. kuntze çiçeğinin ekstraktlarındaki biyoaktif bileşiklerin hplc-dad ile aydınlatılması ve bakteriyal dna-polimeraz inhibisyonları

Abstract

Camellia sinensis (tea) is a species of evergreen small tree whose leaves are used to produce tea. Flowers of this plant was blossom in fall and winter seasons. First, it was observed that methanol extract of tea flower showed strong inhibition on replicative DNA polymerases and this extract was successively fractionated with diethyl ether, ethyl acetate and n-butanol in order to find these inhibitory of active compounds. The phenolic acid and flavonoid contents of the three organic and the remaining aqueous fractions of methanol extract and acidic and basic hydrolyzed fractions were investigated by HPLC-DAD analysis and their antioxidant activity and capacities were determined spectrophotometrically. DNA polymerase inhibition and antimicrobial activities of all extracts and fractions except hydrolyzed extracts were determined. Ethyl acetate and butanol fractions showed strong inhibition on Gram (+) replicative DNA polymerase III? (PolC) isolated from Bacillus subtilis. On the other hand, all fractions except for the aqueous fraction and the methanol extract showed strong inhibition on Gram (-) DNA polymerase III? (DnaE) isolated from Escherichia coli. According to HPLC-DAD analyzes, catechin and syringic acid were highest in ethyl acetate extract while epicatechin, epigallocatechin gallate (EGCG), routine and luteolin derivatives were detected in the highest butanol extract. The ethyl acetate fraction of the methanol extract has the best DPPH free radical scavenging activity and the highest total phenolic content. In all extracts and fractions, the highest antioxidant capacity and activity was detected in the organic fraction of basic hydrolysis. The highest total flavonoid content was determined in the organic fraction of acidic hydrolysis.

Camellia sinensis (çay), yaprakları çay yapmak için kullanılan yaprak dökmeyen küçük ağaç türlerinden biridir. Bu bitkinin çiçekleri sonbahar ve kış mevsiminde çiçeklenir. Öncelikle çay çiçeği metanol ekstraktının Replikatif DNA polimerazlarında güçlü inhibisyon sergilediği gözlendi ve bu inhibisyonda aktif bileşiklerin bulunması için bu ekstrakt ardarda dietil eter, etil asetat ve n-butanol ile fraksiyonlandı. Üç organik fraksiyon ve geri kalan sulu kısım ve metanol ekstraktının asidik ve bazik hidrolize tabi tutulan fraksiyonlarının fenolik asit ve flavonoid içerikleri HPLC-DAD analizi ile araştırıldı ve spektofotometrik olarak da aktioksidan kapasite ve aktiviteleri belirlendi. Hidrolizli ekstraktlar haricindeki tüm ekstrakt ve fraksiyonların DNA polimeraz inhibisyonu ve antimikrobiyal aktiviteleri belirlendi. Etil asetat ve butanol fraksiyonları Bacillus subtilis’ den izole edilen Gram (+) replikatif DNA polimeraz III? (PolC) üzerinde güçlü inhibisyon gösterdi. Öte yandan, sulu fraksiyon hariç tüm fraksiyonlar ve metanol ekstraktı Escherichia coli’ den izole edilen Gram (-) DNA polimeraz III? (DnaE) üzerinde güçlü inhibisyon gösterdi. HPLC-DAD analizlerine göre kateşin ve siringik asit etil asetat ekstraktında en yüksek iken, epikateşin, epigallokateşin gallat (EGCG), rutin ve luteolin türevleri en yüksek butanol ekstraktında tespit edildi. Methanol ekstraktının etil asetat fraksiyonu en iyi DPPH serbest radikal temizleme aktivitesi ve en yüksek toplam fenolik madde içeriğine sahiptir. Tüm ekstrakt ve fraksiyonlar içerisinde ise bazik hidrolizin organik fraksiyonunda en yüksek antioksidan kapasite ve aktivite tespit edildi. En yüksek toplam flavonoid içeriği ise asidik hidrolizin organik fraksiyonunda belirlendi